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来源:发布时间:2023-10-24

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                    超值精品推荐:Cdc42 Pulldown Activation Assay Kit(高分文献来帮忙)

          武汉纽斯特生物技术有限公司的Cdc42活性检测试剂盒主要是利用识别蛋白特异形态的Cdc42-GTP单克隆抗体特异性的去检测细胞提取物或者体外的(样品需要进行GTPγS活化处理)活性Cdc42-GTP的水平。简言之,特异性识别Cdc42活化构象的鼠单克隆抗体可以特异性结合细胞裂解液中的Cdc42-GTP活性蛋白,然后利用Protein A/G将抗原抗体的结合物吸附下来,再利用识别Cdc42 兔多克隆抗体进行免疫印迹分析进行检测。
                                                       
               与传统的 GST- pulldown 方法相比,该试剂盒具有以下明显优势

1. 灵敏度高;诱导蛋白与目标蛋白中的结合对蛋白量的要求比较高。而抗体与蛋白的结合对样本中蛋白的要求比较少。
2. 特异性强;因为诱饵蛋白是需要加上GST标签的重组蛋白,所以是非生理状态下的验证,蛋白质的结构和形式可能与天然状态下存在一定差异,而抗体与目标蛋白的结合,活细胞状态下蛋白质之间的相互作用被保持,所以其反映的是细胞中真实的蛋白情况.
3. 应用更为广泛;试剂盒中能够特异性识别GTP结合状态的三聚体G蛋白或者小G蛋白的单克隆抗体,适应各种种属(Human,Mouse,Rat,Rice plants,Pig Cotton,bacteria,Escherichia coli等)应用范围非常广泛( IP ,WB ,IHC IF ICF,ICC,IHF.FC,Elisa 等)随着这些应用的普及,G 蛋白信号转导的研究进展,必将进一步加快。

                 

  高分文献解析


1.研究背景
 

         

 

       纤维化可以在大多数器官中发展并引起器官衰竭。肺纤维化的最常见类型称为特发性肺纤维化,其中纤维化始于肺周围,然后向肺中心发展,最终导致呼吸衰竭。关于该疾病的发病机理和外周至中心进展的机制知之甚少。
      2019年12月19日,南京医科大学附属无锡人民医院陈静瑜及NIBS汤楠共同通讯在Cell 在线发表题为“Progressive Pulmonary Fibrosis Is Caused by Elevated Mechanical Tension on Alveolar Stem Cells”的研究论文,该研究发现肺泡干细胞(AT2细胞)中Cdc42功能的丧失会导致周围到中心的进行性肺纤维化。
      进一步表明,在肺切除术后和未治疗的老年小鼠中,Cdc42-null AT2细胞不能再生新的肺泡,从而导致AT2细胞持续暴露于升高的机械张力。同时,该研究证明升高的机械张力会激活AT2细胞中的TGF-β信号转导环,从而驱动肺纤维化的外周向中心发展。总而言之,该研究在受损的肺泡再生,机械张力和进行性肺纤维化之间建立了直接的联系。
      纤维化可以在大多数器官中发展并引起器官衰竭。肺纤维化的最常见类型称为特发性肺纤维化,其中纤维化始于肺周围,然后向肺中心发展,最终导致呼吸衰竭。关于该疾病的发病机理和外周至中心进展的机制知之甚少。

      

                       

该研究发现肺泡干细胞(AT2细胞)中Cdc42功能的丧失会导致周围到中心的进行性肺纤维化。进一步表明,在肺切除术后和未治疗的老年小鼠中,Cdc42-null AT2细胞不能再生新的肺泡,从而导致AT2细胞持续暴露于升高的机械张力。同时,该研究证明升高的机械张力会激活AT2细胞中的TGF-β信号转导环,从而驱动肺纤维化的外周向中心发展。总而言之,该研究在受损的肺泡再生,机械张力和进行性肺纤维化之间建立了直接的联系。

2.文献中使用试剂盒中的组份:Anti-active Cdc42 Mouse Monoclonal antibody (Cat#26905) 用于免疫荧光染色(IF)

 

   

   

Mouse AT2 cells were cultured on either non-stretched or stretched silicon membranes (Figure 1A). By day 3, the shape of AT2 cells cultured on stretched silicon membranes changed significantly compared with the round shape of AT2 cells cultured on non-stretched silicon membranes (Figure 1B). By performing immunostaining using an antibody that can specifically recognize guanosine triphosphate (GTP)-CDC42, we found that the expression levels of GTP-CDC42 were significantly increased in stretched AT2 cells (Figures 1B and 1C). In addition,the levels of GTP-CDC42 increased significantly in the lysates of  lungs on post-lung lobe resection (PNX) days 5 and 7 (Figure 1D).Given our previous observation that differentiation of AT2 cells occurs after post-PNX day 5 (Liu et al., 2016), we hypothesized that activation of Cdc42 may be required for differentiation of AT2 cells to AT1 cells. 

3.超值性价比: Cdc42 Pulldown Activation Assay Kit (IP-WB) 完全可以替代文章中,

 

用于Cdc42-GTP 激活水平的分析

 Web:www.neweastbio.com.cn            Tel:18062798497   


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