多克隆抗体
多克隆抗体制备基本步骤
一、抗原的准备
1.抗原由客户提供,如为蛋白抗原,要求其纯度大于90%,至少1-2mg;如使用多肽抗原,整个过程共需70%以上纯度的 10mg多肽抗原,若需要抗原亲和纯化抗体,则另需要5-10mg多肽用于纯化柱的制备。
2. 多肽抗原由我公司合成(参见多肽合成),融合蛋白抗原制备具体协商。
二、兔的全程免疫及采血流程
选取两只新西兰大耳白,采用以下标准的免疫程序:
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步骤
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间隔时间(天)
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备注
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免疫
检测
采血
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0
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采集对照血清,5ml/只兔子;首次与弗氏完全佐剂混合,皮下多点
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20
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再次免疫相同剂量与弗氏不完全佐剂混合,皮下多点
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40
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加强免疫相同剂量与弗氏不完全佐剂混合,皮下多点
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50
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采血10~15 ml用于ELISA效价检测(供QC使用)
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60
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加强免疫相同剂量与弗氏不完全佐剂混合,皮下多点
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| 70 |
终采血,30~50ml血清/只兔子
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结果交付:为客户提供ELISA效价大于1:10000,总量60~100ml抗血清。
三 、抗体纯化
用5-10mg多肽或0.5-1.0mg融合蛋白偶联,制备亲和柱,纯化30-50ml抗血清。
结果交付: ELISA效价大于1:10000。另外有约5ml/只兔子的预取血清,50ml抗血清(若纯化,约1-5mg纯化抗体),约5mg合成的抗原多肽及HPLC,MS报告(只针对于在纽斯特生物合成多肽的客户)。如果客户还有特殊要求,另行协商。
交付时间:2.5~3个月。
各项服务参考报价:
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项目
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价格 (¥)
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60002 兔多克隆抗体制备
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3000
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相关服务:
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抗原筛选
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免费
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60001 多肽合成(约50mg,70%以上纯度)
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见详
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60007 半抗原(多肽 10mg)与KLH的偶联
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550
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60007 半抗原(多肽 10mg)与BSA的偶联
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500
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Western Blotting(WB)实验
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80/样品
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60004 蛋白G纯化(30ml原血清)
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2000
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60004 蛋白A纯化(30ml原血清)
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2000
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60003 特异亲和纯化(30ml原血清/兔)
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3000
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纽斯特生物为客户合成约30 mg多肽,纯度在70 %以上,其中10 mg用于免疫;2 mg用于ELISA检测;10 mg用于特异亲和纯化(如果您选择特异亲和纯化);5mg免费提供给客户用于竞争性实验等用途。纽斯特生物对合成的每一条多肽进行严格的QC,QA把关,给客户提供完善的HPLC图谱,MS图谱及最终质检报告书。
纽斯特生物还提供山羊,豚鼠、鸡等的多克隆抗体制备服务,详情请电话咨询!