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多克隆抗体

 

多克隆抗体制备基本步骤

一、抗原的准备
     1.抗原由客户提供,如为蛋白抗原,要求其纯度大于90%,至少1-2mg;如使用多肽抗原,整个过程共需70%以上纯度的 10mg多肽抗原,若需要抗原亲和纯化抗体,则另需要5-10mg多肽用于纯化柱的制备。
     2. 多肽抗原由我公司合成(参见多肽合成),融合蛋白抗原制备具体协商。
二、兔的全程免疫及采血流程
     选取两只新西兰大耳白,采用以下标准的免疫程序:

步骤

间隔时间(天)

                                                       备注

 

免疫
检测
采血

 

              0

采集对照血清,5ml/只兔子;首次与弗氏完全佐剂混合,皮下多点

             20

再次免疫相同剂量与弗氏不完全佐剂混合,皮下多点

             40

加强免疫相同剂量与弗氏不完全佐剂混合,皮下多点

             50

采血10~15 ml用于ELISA效价检测(供QC使用)

             60

加强免疫相同剂量与弗氏不完全佐剂混合,皮下多点

             70

终采血,30~50ml血清/只兔子

    结果交付:为客户提供ELISA效价大于1:10000,总量60~100ml抗血清。
三 、抗体纯化
    用5-10mg多肽或0.5-1.0mg融合蛋白偶联,制备亲和柱,纯化30-50ml抗血清。
    结果交付: ELISA效价大于1:10000。另外有约5ml/只兔子的预取血清,50ml抗血清(若纯化,约1-5mg纯化抗体),约5mg合成的抗原多肽及HPLC,MS报告(只针对于在纽斯特生物合成多肽的客户)。如果客户还有特殊要求,另行协商。
    交付时间:2.5~3个月
各项服务参考报价:

项目

价格 (¥)

60002 兔多克隆抗体制备

3000

 

 

相关服务:

 

抗原筛选

免费

60001 多肽合成(约50mg,70%以上纯度)

见详

60007 半抗原(多肽 10mg)与KLH的偶联

550

60007 半抗原(多肽 10mg)与BSA的偶联

500

Western Blotting(WB)实验

80/样品

60004 蛋白G纯化(30ml原血清)

2000

60004 蛋白A纯化(30ml原血清)

2000

60003 特异亲和纯化(30ml原血清/兔)

3000

  纽斯特生物为客户合成约30 mg多肽,纯度在70 %以上,其中10 mg用于免疫;2 mg用于ELISA检测;10 mg用于特异亲和纯化(如果您选择特异亲和纯化);5mg免费提供给客户用于竞争性实验等用途。纽斯特生物对合成的每一条多肽进行严格的QC,QA把关,给客户提供完善的HPLC图谱,MS图谱及最终质检报告书。

纽斯特生物还提供山羊,豚鼠、鸡等的多克隆抗体制备服务,详情请电话咨询!