当前位置：
2011 © 版权所有 Wuhan Niusi Te Biotechnology Co., Ltd.
法律声明 隐私权政策 与我们联络 技术支持
地址：武汉东湖新技术开发区光谷生物城创新基地B3-3栋二楼， 邮政编码：430074
联系电话: (027) 87561033 传真: (027) 87561022
|
荷瘤动物模型的建立
目的要求
1、了解荷瘤动物模型的建立方法。
2、了解建立肿瘤动物模型的用途。
二、原理
荷瘤动物模型是将体外人工培养的肿瘤细胞接种于适当的动物体内，通过肿瘤细胞在动物体内的增殖形成实体瘤或血循环中的散在肿瘤。从而研究肿瘤在体内的生长、扩散、生存时间、死亡率等肿瘤生物学特性。同时还可将荷瘤动物用于新的抗肿瘤药物的筛选以及治疗效应与毒副作用的评价研究等。
三、材料
1、BALB/c裸鼠，6～8周龄,体重19～23g,雄雌各半。
2、人B淋巴瘤细胞株Raji。
3、RPMI-1640培养基。
4、胎牛血清。
5、生理盐水（NS ）。
6、碘氟及酒精棉球。
7、台盼蓝染液。
8、游标卡尺。
9、生物倒置显微镜。
10、电子天平。
11、离心机。
12、吸管、试管、载玻片及注射器等。
四、方法
1、收集生长良好的Raji细胞于试管中，1500r/min离心5min，弃上清。
2、加入适量生理盐水重新悬浮细胞，取1滴与等量的台盼蓝染液混合均匀后滴加在载玻片上，用显微镜计数活细胞的比率（计数至少200个细胞，活细胞不着色，死细胞被染成篮色）。要求活细胞在95%以上。
3、将上述细胞再行离心，速度同上。重复洗涤2次。
4、用生理盐水将细胞的浓度调整为5×107/ml。
5、用碘氟及酒精棉球序贯消毒小鼠的前左侧腋下皮肤。
6、用注射器吸取Raji细胞悬液，小鼠皮下注射0.2ml/只。
7、逐日观察小鼠的生存状态，定期用游标卡尺测量瘤的长径、短径和高度。肿瘤体积的计算方法为： V(mm3)= 1/8 (4/3 p´长径´短径´高度)。同时记录成瘤时间及小鼠存活期等指标。
8、根据肿瘤的生长状况，绘制肿瘤生长曲线，计算成瘤率及荷瘤鼠的存活期（接种肿瘤细胞后观察90天）。
五、注意事项
1、各种肿瘤细胞株的致瘤性差异较大，针对具体的肿瘤细胞应摸索适当的接种数量，一般在2～10×107/只。
2、小鼠皮下注射的体积不宜太大，一般为0.2～0.3ml。
3、接种时，注射针刺入皮肤后应轻轻挑起针尖后注入肿瘤细胞，以免刺入太深。
六、思考题
1、用来源于人的肿瘤细胞建立肿瘤模型，为什么选用BALB/c裸鼠？
2、建立肿瘤模型的用途有那些？ |
